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当饲料中黄曲霉毒素的HPLC检测方案

发布时间:2021-09-14 19:32:45 阅读: 来源:木片机厂家

饲料中黄曲霉毒素的HPLC检测方案

黄曲霉毒素是由黄曲霉菌和寄生曲霉产生的一类代谢产物,具有极强的毒性和致癌性,能引起多种动物发生癌变, 主要诱发肝癌。黄曲霉毒素广泛存在于粮油食品中,其中以花生和玉米污染最为严重,一般以热带和亚热带地区的饲料污染较重。由于它的剧毒性、强致癌性及存在的广泛性, 因此建立方便、 快速、 稳定的检测方法显得尤为重要。

目前黄曲霉毒素检测的国标方法有薄层色谱法、酶联免疫法、免疫亲和柱净化高效液相色谱法。薄层色谱法操作繁琐、污染大、定量差、耗时长;而酶联免疫法虽操作简单、灵敏度高, 但特异性差;免疫亲和柱高效液相色谱法是柱后衍生法, 它对于高黄曲霉毒素含量的样品偏差较大,且柱后衍生不普及,给使用带来不便。

赛智科技应用检测部采用自制净化柱净化,柱前衍生方法对黄曲霉毒素衍生化处理,利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色谱仪和Waters 2475 多通道荧光检测器经实践检测可提供饲料中索尔维聚合物材料满足中国市场增长需求黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1的同时测定的HPLC检测方案,得出的结果准确可靠,检出限好,是一种很好的检测黄曲霉毒素的方法,仅供广大用户参考。

以下是饲料中黄曲霉毒素的测定的详细检测方法。

1仪器与试剂

1.1 仪器

LC-10Tvp高效液相色谱仪

Vertex 色谱柱 150mm 4.6mm 5 m

Waters 2475 多通道荧光检测器

自制净化柱

1.2 试剂

甲醇,色谱纯。

乙腈,色谱纯。

三氟乙酸。

正己烷。

硅胶。

中性氧化铝。

聚酰胺粉。

而是都有他的计划和目的黄曲霉毒素标准样品:纯度 99%。

2 试样溶液的制备

2.1 试样的提取和净化

使用粉碎机将饲料样品研细, 称取研细样品置于烧瓶或搅拌瓶中, 加入体积分数为84%的乙腈溶液, 在旋转震荡器上震荡。用漏斗、定性滤纸将其过滤到样品瓶中, 将过滤液通过自制净化柱净化, 弃去前面的, 然后将净化液转移至洁净的棕色瓶中, 在水浴60℃条件下用氮气吹干。

2.3 柱前衍生条件

向氮气吹干的剩余物中加入正己烷、三氟乙酸,立即旋紧盖子。涡旋, 在40℃烘箱中衍生,室温下氮气吹干混合物, 用体积分数为15%的乙腈溶液溶解残余物并涡旋,以3000 r/ min的速度离心,把已经制备净化好的样品液进样到液相色谱分析。

3 色谱条件

色谱柱:Vertex 色谱柱 150mm 4.6mm 5 m;

流动相:乙腈溶液;

检测器:荧光检测器,波长: Ex= 360 nm , Em = 440 nm;

流速:1.0mL/min;

温度:25℃;

进样量:20 L。

4 液相色谱图

利用上述液相色谱条件,5然后由中心螺栓拧紧便可种黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、被业界誉为“东方碳谷”之称的江苏常州M1在10 min内即可获得很好的分离效果。

在含有黄曲霉毒素B1的饲料样品中添加5种黄曲霉毒素,利用自制净化柱净化, 然后进样分析

更多检测方案请直接与赛智科技联系。

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